骆驼体内存在天然的缺失轻链的重链抗体，克隆其可变区可以得到只有重链可变区组成的单域 抗体，称为VHH( ariable domain of heavy chain of heavy chain antibody)，也称为纳米抗体( nanobody. a single domain antibody)。普通的免疫球蛋白的基木结构是分子量为150kDa的四聚体多肽，由两对相同的重链(50kDa)和轻链(25kDa)多肽组成，二者由链间的二硫键链接。轻链由N端的可变区(VL)和C端的一个保守的区域(CL)构成，重链由四个或五个结构域组成N端的可变区(VH)，紧接着三至四个恒定的区域(CH1.CH2CH3可能CH4)。免疫球蛋白形成Y型或T型结构，两个抗原结合区域通过CH1及CH2间的柔性铰链区连接在一起，连到负责起效应的具有保守结构的FC区域。在哺乳动物中这种免疫球蛋白的结构相对比较保守。

（驼可汗内蒙古骆驼奶招商加盟代理） 图1 VHH Fv scFv结构图 图2 VHH缺少CH1域 抗体的FC区域由重链的CH2及CH3构成，介导抗体依赖的细胞毒效应(ADCC)及补体依赖的细胞毒效应(CDO.抗体的N端，配对的VH及VL形成抗体的抗原结合位点(FV)在轻、重链每个可变区中存在三个氨基酸长度及序列高度变异的区域，简称为CDR1，CDR2，CDR3，这三个区域被四个序列相对保守的骨架区分隔开(FR1，FR2，FR3，FR4)。轻重链高变区通过非共价结合聚集成簇，形成大的界面与抗原结合，也即为抗体决定簇。这些超变的区域折叠成一些经典的loop结构。重链可变区的CDR3在长度及氨基酸组成上多变，因此结构也难预测骆驼科血清中有普通的IgG1及重链抗体lgG2(约10kDa)及lgG3(约12kDa)。

驼可汗内蒙古骆驼奶招商加盟代理） 由于3端CH1外显子处剪切信号的点突变导致的可变剪接，造成重链抗体缺少能与轻链结合的CH1区域。IgG1分为lgG1a铰链区19个氨基酸)和IgG1b(铰链区12个氨基酸)lgG2分为IgG2a(铰链区35个氨基酸)IgG2b(铰链区29个氨基酸lgG2c(铰链区15个氨基酸)。lgG3铰链区12个氨基酸)大约15kDa分子量小，但拥有完整的抗原结合位点。在序列上，脊椎动物中，普通抗体和纳米抗体序列大部分相同，但存在五个保守位点氨基酸差异。Leu12Ser(即12位在VH中常为Leu而在VHH中此位常为Se)Val42he/lyr，Gly49Glu，Lu50Arg/ys，和Trp52Gy(不是常保守).VH中42.49.50.52这四个位点主要参与与VL作用，多为疏水的氨基酸，但在VAH中变成了亲水的氨基酸，这种序列的改变增加了纳米抗体的水溶性，减少了抗体的聚合性也直接导致了MHH不能够结合轻链。

驼可汗内蒙古骆驼奶招商加盟代理） 图3 VH和VHH结构差异 图4 V-D-J重排产生VHH