摘要:自从第一次放射免疫分析报告以来,已经开发出了无数的免疫分析,并证明它是广泛的物质如病毒、细菌、疾病生物标志物、食物毒素的体外诊断和环境监测的宝贵分析方法。 (骆驼奶
然而,单克隆抗体技术昂贵,有时冻存的杂交瘤细胞系很难恢复,很难产生高质量的小分子单克隆抗体。由于功能性常规抗体的大小、对两条链的需求以及复杂的翻译后修饰,很难重组表达。许多源于抗体的蛋白质是完整抗体分子的衍生物,包括单价片段,如Fab、单链抗体,以及工程变体,包括糖尿病、三体、小体和单域抗体。然而,这些结构物通常具有较低的亲和力,比完整的抗体分子更不稳定抗体。由于表达的抗体片段的有限溶解度和聚集性会降低表达蛋白的产量,因此产生问题,由于VHs和VLs的高度非功能性结合,杂交瘤细胞株噬菌体抗体库的多样性应该非常大,以增加选择理想抗体片段的可能性。
1993年,Hamers Casterman在骆驼科成员(即骆驼、美洲驼和羊驼)中发现了一个新的抗体亚类,该亚类具有抗原结合囊,(新疆骆驼奶粉代理)仅由重链的可变区域组成,完全没有轻链,这些重链可变结构域的重组表达产生单结构域抗体(VHH)。与其他重组抗体片段相比,VHHs的单结构域特性具有许多优点,特别是在各种表达系统中易于表达,热稳定性高,溶解性好,抗蛋白水解,与常规抗体相比,VHHs的抗原结合模式非常独特。由于传统抗体的结合区域由重链和轻链组成,它们倾向于通过大的表面积与蛋白质结合,并在重链和轻链的界面形成的深裂缝中包含小分子。因为重链抗体需要补偿缺失的轻链,它们的互补决定区3(CDR3)通常较长,它允许形成“手指状”形状并随后结合在蛋白质靶的凹槽中。这允许重链抗体用作酶抑制剂。当结合到小分子时,它们的结合通过涉及三个高变环和框架区(FRs)还观察到,VHH与咖啡因的结合伴随着半抗原诱导的VHH二聚。
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